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飞诺美Phenomenex Kinetex 核壳色谱柱使用注意事项

更新时间:2025-03-11   点击次数:106次
Kinetex 核-壳科技
使用包含纳米结构技术的溶胶凝胶处理技术,在固态硅胶核上培养出均一稳定的多孔外壳,形成核-壳颗粒。该颗粒形态会产生比全多孔颗粒更小的谱带展宽,从而带来较高的柱效。

色谱柱安装

色谱柱标签上的箭头表明流动方向。在使用或反向冲洗Kinetex 1.3µm色谱柱时,切勿与箭头方向相反。Phenomenex建议使用HPLC/UHPLC Sure-Lok™耐高压PEEK阳性螺母接头来安装Kinetex柱至HPLC/UHPLC系统上。便捷的单件设计(AQ0-8503)能耐受至12000psi(827bar)的压力。而三件式单元(AQ0-8504和AQ0-8505)包含一个PEEK螺母、套管和不锈钢扣紧环,能提供不漏连接,并且能耐受至19000psi(1310bar)的压力。方便的螺母拧紧工具(AQ0-8530)可帮助实现不漏连接。
流动相限制
• Kinetex C18、XB-C18、 C8、和 Phenyl-Hexyl色谱柱于pH 1.5至10*稳定且可用于典型的反相流动相(甲醇水、乙腈水或适当的缓冲盐水溶液/甲醇或缓冲盐水溶液/乙腈的混合物)。
• Kinetex PFP色谱柱于pH 1.5至8.5稳定,可用于典型的反相流动相(甲醇水、乙腈水或适当的缓冲盐水溶液/甲醇或缓冲盐水溶液/乙腈的混合物)。 
• Kinetex HILIC色谱柱于pH 2至7.5稳定,可用于典型的HILIC流动相(乙腈/缓冲盐水溶液的混合物)。

* 仅适用于等度条件。

请只使用高纯度的试剂和较高 品质的色谱级溶剂来制备流动相。痕量杂质可能会大幅度减少柱寿命。所有流动相在使用前都需经过滤和脱气。请确保样品和基质能wan全溶解于流动相,不相溶的溶剂或缓冲盐沉淀可永jiu损害色谱柱。




请仔细阅读这些注意事项:

请避免:
• 在低于每种Kinetex色谱柱的pH值下限下操作,因为这将会水解键合相
• 在高于每种Kinetex色谱柱的pH值上限下操作,因为这将会溶解硅胶
• 在使用或反向冲洗Kinetex 1.3um色谱柱时,与色谱柱标签箭头方向相反
• 不相溶的溶剂或缓冲盐
• 突然的压力变化
操作背压
Kinetex 5μm与2.6µm色谱柱的zui高操作压力是8700psi(600bar*)、Kinetex 1.7µm与1.3μm 色谱柱的zui 高操作压力是15000psi(1000bar)。流动相流速设置应使色谱柱背压不超过zui 高操作压力。请注意、在zui高压力下或接近zui 高压力下操作会导致柱寿命缩短。
* 2.1mm ID色谱柱的背压可稳定至1000bar。
操作温度
Kinetex色谱柱使用的zui高温度达60°C。25°C以上可以降低流动相粘度和背压、提高传质率以及增强选择性。当在高pH值(>8)下操作时,建议降低运行温度以延长柱寿命。请注意,在zui高温度下或接近zui高温度下操作会导致柱寿命缩短。
色谱柱清洗和再生


如果您的柱压持续升高,您可以使用以下建议的低流速反冲洗色谱柱(不适合用于任何Kinetex 1.3μm色谱柱或其他制造商的色谱柱):

柱子内径
流速
2.1 mm
0.1 mL/min
3.0 mm
0.3 mL/min
4.6 mm
0.5 mL/min

反相 (C18、XB-C18、C8、Phenyl-Hexyl和PFP)

Kinetex反相色谱柱以10至20倍柱体积的下列溶剂冲洗
1)5:95乙腈/水(或甲醇/水),去除缓冲盐
2)95:5乙腈/水(或甲醇/水)
3)THF(四氢呋喃)
4)95:5乙腈/水(或甲醇/水)
5)5:95乙腈/水(或甲醇/水)
6)流动相平衡

HILIC

Kinetex HILIC色谱柱以10至20倍柱体积的下列溶剂冲洗:
1)95%水/5%乙腈(去除缓冲盐)
2)95%100mM醋酸铵,pH 5.8/5%乙腈
3)95%水/5%乙腈
4)流动相平衡
色谱柱保存
反相(C18、XB-C18、C8、Phenyl-Hexyl和PFP)
色谱柱几天不用时,应保存在≥50%(v/v)乙腈/水或甲醇/水中。如果流动相含缓冲盐,保存前请先用10至20倍柱体积的水/乙腈或水/甲醇冲洗色谱柱以去除缓冲盐。冲洗色谱柱后请用柱塞头旋紧色谱柱,以防保存溶剂挥发和柱床变干。

HILIC

色谱柱几天不用时,应保存在90%(v/v)乙腈/水中。如果流动相含缓冲盐,保存前请先用10至20倍柱体积的乙腈/水(90:10)冲洗色谱柱以去除缓冲盐。冲洗色谱柱后请用柱塞头旋紧色谱柱,以防保存溶剂挥发和柱床变干。
Kinetex 1.3µm色谱柱操作提示
使用Kinetex1.3μm色谱柱应避免并降低流动相储液器以及UHPLC溶剂输送泵中微生物的滋生。

以下是几个常用技巧:

溶剂:使用超 纯、较高 品质的UHPLC溶剂。
水性流动相:每天更换或加入5-10%的有机溶剂。
流动相储液器:在重新注入流动相前,使用甲醇冲洗储液器。
UHPLC系统:每周使用异丙醇和甲醇冲洗。


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